實(shí)驗(yàn)原理
陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿癥（PNH）患者的紅細(xì)胞由于膜的缺陷，對(duì)補(bǔ)體的敏感性增加，這些對(duì)補(bǔ)體敏感的紅細(xì)胞能被正常血清 所溶解，特別在血清 酸性條件下（pH6.4-6.5）經(jīng)37℃孵育，溶血更明顯。
實(shí)驗(yàn)方法
材料：
1.0.25mol/LHCL
2.0.85%生理鹽水
3.離心機(jī) 、試管 、水浴 箱等
方法：
1.取靜脈血2-3ml，取下針頭，將血輕輕注入試管 中；
2.離心吸出血清備用；
3.將血塊搗碎，用生理鹽水洗滌3次，配成50%紅細(xì)胞懸液備用；
4.按下表進(jìn)行操作；
|
待測(cè)管（ml）
|
對(duì)照管（ml）
|
|
0.5
|
/
|
|
0.025
|
0.025
|
|
/
|
0.5
|
|
0.05
|
0.05
|
5.兩管均加塞，置37℃水浴 箱中1h后直接觀察或者離心后觀察結(jié)果。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果計(jì)算
溶血為陽(yáng)性，不溶血為陰性
注意事項(xiàng)
1.本實(shí)驗(yàn)不用抗凝血，因抗凝劑會(huì)阻礙溶血，降低敏感性，出現(xiàn)假陰性；
2.血清酸化后立即塞緊管口，以防二氧化碳逸出；
3.血清需新鮮，以免補(bǔ)體失活，造成假陰性；
4.實(shí)驗(yàn)用具要干燥，針頭要粗，紅細(xì)胞懸液要直接滴入液體，不要沿管壁流下，以免溶血。
