GenXion Fast Western Transfer Buffer 10× (快速轉(zhuǎn)膜緩沖液)產(chǎn)品概述
貨號:JX068T
產(chǎn)品概述
本品為預(yù)先制配好的快速轉(zhuǎn)膜緩沖液,含散熱因子配方
可承受400mA電流在30分鐘即完成蛋白轉(zhuǎn)膜過程
(視轉(zhuǎn)膜目的蛋白分子量的大小來調(diào)整轉(zhuǎn)印時間長短)
常溫條件下轉(zhuǎn)膜,無須在冰浴條件下進行
可兼容適用于其他品牌制成的PAGE膠或電泳后的PAGE膠
搭配GenXion能達到更好條帶效果
適用于不同品牌轉(zhuǎn)膜設(shè)備,無須替換設(shè)備
未開封常溫條件下保存五年
產(chǎn)品優(yōu)點:
本配方緩沖液可以大大加快轉(zhuǎn)膜的速度,并且在轉(zhuǎn)膜過程中,不會產(chǎn)生大量熱量,
不會導(dǎo)致蛋白變異或降解,不會破壞蛋白本身的完整性。
?快速: 相較傳統(tǒng)方式的90分鐘-4小時,此緩沖液可以將轉(zhuǎn)膜時間縮短到< 50分鐘。
?兼容性: 可使用現(xiàn)有設(shè)備,適用所有的蛋白膠,濕轉(zhuǎn)系統(tǒng)以及膜類型。
?轉(zhuǎn)膜效率高: 100% 轉(zhuǎn)移6-240kD蛋白。
?工作液可重復(fù)使用3-5次。
注意事項:
1.具體轉(zhuǎn)膜時間需針對蛋白大小略微調(diào)整;不同廠家電源供應(yīng)器的電阻所造成電壓和電流失衡
需留意,我們所建議條件是400mA電流對應(yīng)約為80-110V電壓。
2.緩沖液可以反復(fù)利用,但每次使用的轉(zhuǎn)膜時間會改變緩沖液的離子濃度和PH值,因此重復(fù)使用
次數(shù)可觀察緩沖液的澄清度及黏稠度;
3.反復(fù)利用的緩沖液須冷藏保存,以避免長菌;
4.不同蛋白大小所需轉(zhuǎn)印時間不同,一般50KDa大小以內(nèi)的目的蛋白約30分鐘,50KDa-120KDa的
目的蛋白需要多加5-10分鐘, 120KDa-180KDa的目的蛋白可再加5-10分鐘
(以上僅供參考建議,實際要考慮目的蛋白在總蛋白中的含量濃度占比)
實驗用途
用于蛋白轉(zhuǎn)膜實驗(將蛋白從膠上轉(zhuǎn)移到PVDF膜上)
在WB過程中從SDS-PAGE膠上轉(zhuǎn)移蛋白至膜上是非常關(guān)鍵的步驟
優(yōu)化轉(zhuǎn)移時間往往需要實驗多次,如何保證蛋白完全轉(zhuǎn)移技巧:
1.使用預(yù)染的marker:
預(yù)染marker能夠直觀的觀察到跑膠情況,而且在轉(zhuǎn)移過程中也是很好的工具,
在完成膜跡后觀察膜上的 marker 看是否所有條帶都已經(jīng)轉(zhuǎn)移至膜上。
2.在轉(zhuǎn)印裝置中加兩塊膜:
小分子量的蛋白轉(zhuǎn)移的比較快,為保證大分子蛋白的轉(zhuǎn)膜,長時間的轉(zhuǎn)膜可能使小分子蛋白透過膜,
可以加入兩塊膜,如果能在 dierkuai 膜上檢測到小分子蛋白,說明轉(zhuǎn)膜時間過長。
3.在轉(zhuǎn)印后對膠染色:
如果轉(zhuǎn)膜時間不夠優(yōu)化,通過對膠染色,在膠上能夠觀察到未轉(zhuǎn)移完全的蛋白,
這種情況在轉(zhuǎn)膜大分子蛋白是常見,使用銀染或者考馬斯亮藍的方法都可以。