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產(chǎn)品名稱:
Taq DNA Polymerase
產(chǎn)品型號(hào):
JX032
產(chǎn)品展商:
晶欣生物
產(chǎn)品文檔:
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Taq DNA Polymerase簡(jiǎn)稱Taq酶，是最常用的DNA聚合酶之一。
Taq DNA Polymerase是一種來源于嗜熱菌Thermus aquaticus的高度熱穩(wěn)定的DNA聚合酶，95℃孵育時(shí)的半衰期大于40分鐘。Taq酶的分子量為94 kDa。Taq酶可以催化5'至3'方向的依賴于DNA模板的脫氧核苷酸的聚合。Taq酶沒有3'至5'的外切酶活性，有非常低的5'至3'外切酶活性。由于Taq酶沒有3'至5'的外切酶活性，因此在DNA聚合過程中相當(dāng)于核苷酸轉(zhuǎn)移酶的作用，最終會(huì)導(dǎo)致PCR產(chǎn)物的3'末端會(huì)產(chǎn)生3'-dA overhangs，即產(chǎn)生帶一個(gè)A的3'粘端。
來源：本Taq DNA Polymerase為recombinant Taq DNA Polymerase，通過大腸桿菌表達(dá)純化獲得，和純化獲得的天然Taq DNA Polymerase在各方面的性質(zhì)相同。
用途：PCR、DNA標(biāo)記和測(cè)序等。
本Taq酶可以擴(kuò)增長(zhǎng)度達(dá)5kb的DNA片斷，最長(zhǎng)可以擴(kuò)增長(zhǎng)達(dá)8kb的DNA片斷。通常適合擴(kuò)增3kb以下的DNA片斷。
用本Taq酶擴(kuò)增產(chǎn)生的PCR產(chǎn)物帶有3'-dA overhangs，可以用于基于T載體的PCR片斷克隆。
PCR反應(yīng)過程中可以摻入生物素、地高辛或一些熒光機(jī)團(tuán)標(biāo)記的脫氧核苷酸，即可以用核酸的標(biāo)記反應(yīng)。
本Taq酶除用于各種PCR擴(kuò)增以及DNA標(biāo)記外，還可以用于DNA測(cè)序。
活性定義：One unit of the enzyme catalyzes the incorporation of 10 nmol of deoxyribonucleotides into a polynucleotide fraction(adsorbed on DE-81) in 30 min at 70℃. Enzyme activity is assayed in the following mixture: 67 mM Tris-HCl(pH 8.8 at 25℃), 6.7 mM MgCl2, 1 mM 2-mercaptoethanol, 50 mM NaCl, 0.1 mg/ml BSA, 0.75 mM activated calf thymus DNA, 0.2 mM of each dNTP, 0.4 MBq/ml[3H]dTTP。
純度：不含DNA內(nèi)切酶、外切酶和磷酸酯酶，不含RNA酶，滿足常規(guī)PCR反應(yīng)要求。
酶儲(chǔ)存溶液：20 mM Tris-HCl(pH 8.0), 1 mM DTT, 0.1 mM EDTA, 100 mM KCl, 0.5%(v/v)Nonidet P40, 0.5%(v/v)Tween 20 and 50%(v/v)glycerol。
10×PCR Buffer(with Mg2+)：100 mM Tris-HCl(pH 8.8 at 25℃), 500 mM KCl, 15mM MgCl2, 0.8%(v/v)Nonidet P40。
失活或抑制：酚氯仿抽提可以使Taq酶失活，加入脫氧膽酸鈉至0.06%，SDS至0.01%，或sarkosyl至0.02%均可以抑制Taq酶。
